Nel presente rapporto tecnico viene documentata la messa a punto della procedura e degli strumenti molecolari necessari per l'ottenimento di linee transgeniche RNAi. Nello specifico, è stato messo a punto un sistema di trasformazione genetica mediata da agrobatterio per la varietà M82, questa, per sue caratteristiche morfo-fisiologiche è recalcitrante alla trasformazione genetica e alla rigenerazione in vitro, dunque la metodica messa a punto consentirà in modo efficiente l'ottenimento di una serie di linee transgeniche per l'analisi funzionale di geni relativi alla qualità organolettica e nutrizionale del pomodoro coltivato. La trasformazione con il gene PDS ha permesso di ottenere un immediato riscontro fenotipico dell'avvenuto silenziamento genico senza dover effettuare ulteriori e costose analisi di biologia molecolare. Per quanto riguarda gli sviluppi futuri della tecnica sarà necessario aggiungere una fase di verifica finale per i fenotipi RNAi non identificabili macroscopicamente.
Messa a punto di un protocollo di "RNA interference" (RNAi) per l'analisi funzionale di geni in pomodoro cv. M82
2016
Abstract
Nel presente rapporto tecnico viene documentata la messa a punto della procedura e degli strumenti molecolari necessari per l'ottenimento di linee transgeniche RNAi. Nello specifico, è stato messo a punto un sistema di trasformazione genetica mediata da agrobatterio per la varietà M82, questa, per sue caratteristiche morfo-fisiologiche è recalcitrante alla trasformazione genetica e alla rigenerazione in vitro, dunque la metodica messa a punto consentirà in modo efficiente l'ottenimento di una serie di linee transgeniche per l'analisi funzionale di geni relativi alla qualità organolettica e nutrizionale del pomodoro coltivato. La trasformazione con il gene PDS ha permesso di ottenere un immediato riscontro fenotipico dell'avvenuto silenziamento genico senza dover effettuare ulteriori e costose analisi di biologia molecolare. Per quanto riguarda gli sviluppi futuri della tecnica sarà necessario aggiungere una fase di verifica finale per i fenotipi RNAi non identificabili macroscopicamente.I documenti in IRIS sono protetti da copyright e tutti i diritti sono riservati, salvo diversa indicazione.