Ottimizzazione di tecniche di trasformazione tramite A. tumefaciens per l'analisi funzionale di geni in pianta

Nell'ambito del progetto PON 02_00395_3215002 'Valorizzazione di Produzioni Ortive Campane di Eccellenza con Strumenti di Genomica Avanzata (GenHORT)' la linea di attività 2.3.2 prevedeva la validazione funzionale dei geni Parallel Spindles-Like (PSL), isolati in patata come candidati al controllo spaziale dei fusi nella meiosi II maschile e, quando mutati, alla formazione di polline 2n. Il presente rapporto tecnico descrive la messa a punto di un protocollo per il silenziamento genico mediante "RNA interference" (RNAi) in Solanum tuberosum tetraploide cv Desirée e dell'accessione Cmm1 della specie selvatica diploide S. commersonii. Sono state ottenute dodici linee transgeniche dalla cv Desirée e tredici linee da Cmm1 con parziale silenziamento del gene PSL1 come evidenziato dalle analisi di espressione effettuate in tessuti vegetativi e riproduttivi. L'analisi preliminare del fenotipo del polline suggerisce che il gene PSL1 sia effettivamente coinvolto nella microgametogenesi di patata.